Антитела IgM к вирусу эпидемического паротита

Выявление антител IgM к паротиту (anti-Mumps IgM)

Исследование выявляет наличие специфических противовирусных белков класса М к Mumps virus, возбудителю эпидемического паротита, обеспечивающих первичную реакцию на заражение и свидетельствующие об острой фазе инфекции. Принцип исследования основан на специфичном иммунном соединении противовирусных антител, вырабатываемых организмом, с антигеном.

Подготовка к исследованию:

• Анализ проводится утром, натощак
• С последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов
• Исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала
• Не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: венозная кровь
• Синонимы (rus): Антитела класса IgМ к вирусу эпид-паротита
• Синонимы (eng): Антитела класса IgМ к вирусу эпид-паротита 
• Методы исследования: иммуноферментный анализ
• Единицы измерения: Ед/л
• Сроки выполнения: 5-7 дней

Общие сведения о вирусе эпидемического паротита

Mumps virus относится к роду Paramyxoviridae и вызывает «свинку» - детскую инфекционную болезнь, которая характеризуется появлением в области слюнных желез болезненной тесто-подобной припухлости. При тяжелом течении этого заболевания поражается нервная система (энцефалит, менингит), развивается панкреатит, артрит, орхит (у мальчиков - воспаление яичек), сахарный диабет, мастит (у девочек - воспаление грудных желез), тугоухость. Вирус представляет опасность для беременных женщин - повышен риск инфицирования малыша и его гибель.

Иммунная система организма в ответ на заражение вирусом начинает выработку специфических антител М, которые появляются в крови уже на третий день после заражения. В острой стадии инфекционного процесса их содержание в организме максимально, спустя 1,5-2 месяца их концентрация постепенно снижается.

Причины проведения анализа

При подозрении на заражение эпидемическим паротитом требуется своевременно проводить лабораторную диагностику, чтобы выявлять зараженных пациентов. Важно не только определить тип патогенного микроорганизма, но и оценить степень реакции иммунитета. Если врач предполагает наличие острой стадии, рекомендуется иммуноферментный анализ для оценки титра IgM. 

Благодаря тесту можно выявить следующие данные:

• определение стадии развития болезни, IgM выявляют только в острый период, то есть первые 2 недели после первичного инфицирования;
• дифференциальная диагностика с другими эпидемическими патологиями, которые имеют схожую симптоматику с паротитом;
• оценка состояния здоровья человека, который имел близкий контакт с зараженным пациентом;
• оценка назначенного лечения, если оно правильное, постепенно концентрация IgM будет уменьшаться, на смену им придут IgG, которые сохраняются пожизненно, предотвращая рецидив;
• комплексная диагностика состояния организма после проведенной вакцинации, IgM могут появляться лишь на время, в последующем периоде остаются IgG, которые должны циркулировать в системном кровотоке пожизненно.

Требуется помнить, что по генотипу Mumps virus схож с парагрипом, поэтому при неясной симптоматике рекомендуется выполнять не только ИФА, но и ПЦР тест. Так можно провести точную дифференциальную диагностику.

Кому и когда специалист может назначить обследование?

Квалифицированные педиатры, терапевты, инфекционисты назначают анализ для подтверждения эпидемического паротита при наличии у пациента:

• головной боли;
• лихорадки;
• мышечной слабости;
• припухлости слюнных желез.

Исследование также проводят при дифференциальном диагностировании менингита или паротита, которые могут быть вызваны бактериальной инфекцией.

Особенности исследования

При выполнении иммуноферментного анализа для выявления IgM против паротита требуется помнить несколько особенностей.

1. Анализ не выявляет генотип вируса, а лишь оценивает наличие и титр специфических антител, которые должны вырабатываться лишь при заражении паротитом.
2. Иммуноглобулины класса М невозможно определить первые 3 суток после инфицирования, а также через 2 недели после заражения. В этот период их концентрация либо крайне мала, либо полностью исчезла.
3. Нельзя подтверждать наличие паротита лишь по результатам ИФА. Требуется комплексная диагностика, в которую входит общий осмотр, инструментальное обследование, другие лабораторные тесты.
4. Эпидемический паротит заразен. Если у пациента были выявлены IgM, ему требуется изолироваться от остальных людей, чтобы не вызвать передачу инфекции.
5. Перед сдачей анализа важно пройти предварительную подготовку, чтобы исключить риск получения недостоверных данных. Они могут быть ложноотрицательными или ложноположительными.
6. Для исследования в качестве биологического материала требуется проводить забор венозной крови. Капиллярная кровь не подходит, так как в ней концентрируется минимальное количество форменных элементов, антител и других веществ. Другие биологические жидкости и ткани не содержат иммуноглобулины.
7. При возникновении первичных симптомов паротита рекомендуется первоначально сдавать ПЦР анализ. Он определяет концентрацию возбудителя, даже если она минимальна. Но затем врач обязательно назначает иммунологический тест, чтобы оценить степень реакции организма, качество лечения.

Анализ может назначить педиатр, терапевт или инфекционист. К выбранному специалисту возвращаются после получения результата, чтобы расшифровать выявленные данные.

Поэтапное проведение анализа

При подозрении паротита назначают иммуноферментный анализ, выявляющий иммуноглобулины класса M. Основным источником для исследования является венозная кровь. Ее берут из локтевой ямки, сразу перемещая в пробирку с антикоагулянтом, не допускающим образования тромбоцитарного сгустка. Полученный образец сразу же отправляют в лабораторию, где его исследуют по этапам.

1. Размещение пробирок в приборе для центрифугирования. Их устанавливают по кругу, чтобы прокручивать образцы. Каждая пробирка должна быть подписана. После завершения прокручивания на высоких оборотах содержимое разделяется на 2 фазы. Снизу будет красная часть с форменными элементами. Наверху окажется плазма, в которой концентрируются более мелкие вещества, в том числе и иммуноглобулины.
2. Подготовка планшета. В часть лунок капают конъюгат, в котором уже расположены антигены, специфические для паротита. Они меченые, поэтому после взаимосвязи с антителами диагностические приборы определяют иммунные комплексы с точностью. Рядом ставят контрольные образцы. Один из них заведомо положительный, а другой содержит лишь физраствор, поэтому становится отрицательным.
3. Перемещают образцы плазмы на планшет. Для этого применяют специальный лабораторный шприц, которым отмеряют не более 1 мл. Плазма должна размещаться только в тех лунках, где присутствует конъюгат.
4. Ускорение иммунологической реакции. Чтобы иммунные комплексы сформировались быстрее, планшет размещают в приборе для инкубации, где повышают температуру до человеческих пределов.
5. Оценка наличия или отсутствия антител IgM на фотоэлектрокалориметре. Прибор просвечивает образцы световым лучом, его программируют под заранее известную длину волны. Так можно не только выявить концентрацию иммуноглобулинов, но и рассчитать их точное количество.

Особенность ИФА состоит в том, что лаборанту не требуется самостоятельно подсчитывать антитела. За него это делает фотокалориметр. Аппарат распечатывает полученный результат на бланке, который передают пациенту. Самостоятельно он сможет определить, есть ли в его организме паротит, но только врачу доступна оценка степени иммунологической реакции.

В результате тест бывает положительным, отрицательным и сомнительным. В последнем случае требуется повторить анализ, чтобы не допустить получение ложных данных. Важно своевременно проводить диагностику, чтобы выявлять зараженных пациентов, не допуская развития эпидемической обстановки. Для самого больного оценка иммунологического статуса важна, так как можно оценить качество назначенного лечения, период перехода болезни в этап выздоровления.

Расшифровка данных анализа

Показатель нормы: содержание антител M от 0 до 0,69 Ед/л - отрицательный результат, инфицирование Mumps virus отсутствует.

Уровень IgM от от 0,7 до 1,09 Ед/л считается сомнительным результатом - стадия инкубационного периода (рекомендовано повторить анализ через неделю), период после проведенной вакцинации (антитела не обнаруживаются у более 50% пациентов).

Титр свыше 1,11 Ед/л считают положительным результатом - текущий острый инфекционный процесс.

Возбудитель эпидпаротита обладает антигенным сходством с вирусом пара-гриппа, именно поэтому возможно получение ложноположительного результата. В таком случае необходимо повторить исследование в комплексе с определением концентрации IgG.