Анализ отпечатков трепанобиоптата костного мозга

Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга проводится для диагностирования и клинического разграничения заболеваний системы крови.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: Образец костного мозга
Синонимы (rus): Морфологическое исследование трепанобиоптата костного мозга
Синонимы (eng): Morphological examination of bone marrow trepanobioptate
Методы исследования: Цитологическое исследование

Красный костный мозг – это главный кроветворный орган человека, который находится в плоских костях. Основная его функция заключается в образовании и созревании форменных кровяных элементов (эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов). Гемопоэз представляет собой сложную систему, регуляция которой возможна только при взаимодействии с соединительной оболочкой, выстилающей костномозговую полость – стромой. В ее составе имеются эндотелиальные, жировые и эндостальные клетки, образующие ячейки для клеток миелоидного ряда.

К сожалению, при подозрении на развитие в кроветворной системе патологических процессов практикующие специалисты не всегда могут поставить точный диагноз по итоговым данным исследований периферической крови. Особенно сложные случаи требуют изучения отпечатков трепанобиоптата костного мозга, полученных путем забора биологического материала непосредственно из губчатых костей скелета.

Важность исследования

При образовании патологических клеток в красном костном мозге развиваются гематологические заболевания, часть из которых носит злокачественный процесс. Если не остановить болезнь на ранних стадиях, она быстро начнет развиваться, значительно ухудшая самочувствие пациента, вплоть до летального исхода. Поэтому требуется провести своевременную диагностику, в которую входит цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга.

С его помощью для пациента и врача появляются следующие преимущества:

дифференциальная диагностика между разными видами гематологических патологий, которые также требуется отличить от системных заболеваний, имеющих схожие симптомы;
дифференциальная диагностика между доброкачественным или злокачественным разрастанием тканей;
оценка степени распространения патологии, отслеживание динамики ее развития уже после назначения методов терапии;
определение стадии заболевания – острая, хроническая, ремиссия (большинство гематологических патологий полностью не устраняются, поэтому вместо выздоровления у пациента наблюдается ремиссия);
определение вида злокачественных клеток, в зависимости от которых пациенту устанавливают диагноз миеломы, лимфогранулематоза, лейкоза и других патологий;
оценка назначенных методов терапии в процессе их применения, а также после завершения курса (так врач может сменить тактику лечения, подобрать новые препараты или их дозировки, назначить более радикальные методы).

Назначение на процедуру получают у гематолога, онколога, терапевта или иного специалиста, который заподозрил заболевание. Расшифровку должен проводить только профильный врач. Например, если подозревается злокачественный процесс, этим занимается онколог.

Только благодаря этому анализу можно узнать точный клеточный состав красного костного мозга, что позволит определить диагноз с высокой достоверностью. Однако процедура забора биоматериала болезненная, поэтому цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга проводится в крайних случаях при подозрении заболевания. Для профилактики его не назначают.

Когда делают анализ?

Проведение цитологического анализа отпечатков трепанобиоптата костного мозга необходимо при:

диагностировании множественной миеломы, а-пластической анемии и миелопролиферативных заболеваний – эссенциальной тромбоцитемии, идиопатического миелофиброза, истинной полицитемии;
увеличении селезенки неясной этиологии;
определении стадии лимфогранулематоза и характера поражения костного мозга при лимфолейкозе;
оценивании полноты ремиссии лейкоза;
подозрении на метастазы из злокачественных новообразований других органов;
мониторинге состояния больных гематологических отделений при проведении курса лечебных мероприятий.

Подготовка

Большинство факторов окружающей среды не влияет на состав костного мозга. Однако при подозрении заболевания врачи рекомендуют придерживаться следующих советов по подготовке, чтобы результаты получились достовернее:

запрет употребления новых лекарственных средств, особенно из сильно действующих групп (например, цитостатики);
запрет проведения инструментальных методов исследования, которые могут повлиять на клеточный состав (рентгенография, компьютерная или магнитно-резонансная томография).

Перечисленных рекомендаций придерживаются за 2 недели до теста. Как только забор биоматериала был произведен, все запреты снимаются.

Методика проведения анализа

Взятие образца биологического материала осуществляется в условиях клинико-диагностического центра. Для выполнения процедуры используется специальная игла (трепан), оснащенная предохранителем, который препятствует чрезмерно глубокому проникновению в полость кости – это обеспечивает безопасность манипуляции.

Квалифицированный специалист выполняет следующие действия:

дезинфицирует кожные покровы 70% медицинским спиртом;
вводит местный анестетик;
прокалывает надкостницу подвздошной кости и получает образец биоматериала.

Окрашивание биоматериала

После взятия образца красного костного мозга из трубчатой кости делают отпечаток на лабораторном стекле. Рекомендуется создавать сразу 3-5 препаратов, чтобы оценить больше клеток, не упустить развития патологии.

Далее приступают к его обработке:

на стекло с биоматериалом капают немного спирта, чтобы зафиксировать клетки в исходном положении, не дать им дальше размножаться или подвергаться некрозу;
устанавливают стекла на рельсы, под которыми располагают емкость, куда должна стекать лишняя жидкость в процессе окрашивания;
разводят выбранный краситель до требующейся консистенции, затем наносят на предметное стекло, чтобы оно полностью покрылось жидкостью;
ожидают 20-40 минут, чтобы каждая клетка успела окраситься, не осталось пустот (период может отличаться для каждого красителя);
смывают краситель проточной водой без применения очищенных жидкостей, так как клетки успели зафиксироваться, поэтому их состав не сможет поменяться.

После окрашивания мазок требуется высушить, чтобы исключить риск повреждения структуры при механическом воздействии (например, из-за прикасания пальцами). Для сушки достаточно расположить стекла на свежем воздухе. Попадание прямых солнечных лучей или применение приборов с высокой температурой недопустимо.

Микроскопия

Окрашенные мазки отправляют цитологу. Он просматривает их под микроскопом по следующему порядку:

подключают осветительную лампу микроскопа, чтобы подсвечивать стекло, улучшая видимость клеток;
устанавливают биоматериал по центру на предметном столике, закрепляют держателем, чтобы в ходе исследования не происходило сдвигов;
при помощи окуляра с дальним приближением просматривают расположение клеток, их общую структуру;
на окрашенную часть наносят каплю масла, сверху ставят покровочное стекло, чтобы не испачкать микроскоп;
используют окуляр с максимальным приближением, чтобы в точности определить морфологию клеток, в которую входит мембрана, ядро, цитоплазма, внутренние органеллы;
оценивают структуру и количество нормальных клеток, а также ищут патологические элементы.

В таком порядке просматривают каждое стекло. Цитологу важно не только отыскать патологические клетки, но и выявить изменение соотношения нормальных структур. Этот вариант тоже относится к патологии, требует лечения. Все данные врач записывает в бланк, его передают лечащему врачу или пациенту. Расшифровкой занимается только специалист, который учитывает полученные данные, а также историю болезни, симптомы, наследственность и прочие данные.

Особенности исследования

При назначении цитологического исследования отпечатков трепанобиоптата костного мозга учитывают следующие особенности:

проводят только отпечаток свежего биоматериала, иначе содержащиеся клетки успеют видоизмениться, из-за чего данные получатся ложными;
фиксацию спиртом проводят немедленно после отпечатка;
без окрашивания отпечаток рассмотреть невозможно, содержащиеся клетки прозрачные, поэтому не видимы под микроскопом;
при получении данных от результатов исследования учитывают также дополнительные лабораторно-инструментальные анализы, чтобы установить точный диагноз.

Стекла хранят у цитолога или онколога в случае обнаружения злокачественного процесса.

Расшифровка анализа

Отпечаток трепанобиоптата красного костного мозга позволяет тщательно изучить его клеточный состав и получить достаточно информации о соотношении и степени активности всех ростков кроветворения.

Заключение врача цитолога отражает итоговые данные исследования:

определение типа кроветворения;
процентное содержание клеточных элементов;
костномозговые индексы созревания нейтрофилов, эритробластов, лейкобластов;
наличие клеток, характерных для определенных патологических процессов.

Точная интерпретация результатов анализа проводится лечащим врачом на основе особенностей клинической картины и итоговых данных других лабораторных и инструментальных исследований.

Цитология: отпечаток трепанобиоптата костного мозга