Цитологическое исследование акантолитических клеток

Цитологическое исследование мазков-отпечатков со дна свежих эрозий слизистых или кожных покровов позволяет обнаружить акантолитические клетки, являющиеся маркером тяжелого заболевания – пемфигуса (или пузырчатки).

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: Образец ткани
Синонимы (rus): Цитологический мазок, мазок на цитологию
Синонимы (eng): Cytopathology: fine needle aspiration biopsy (FNAB), scrapings, Smear tests
Методы исследования: Цитологическое исследование

Акантолитические клетки Павлова-Тцанка (названные в честь врачей, впервые предложивших метод микроскопии для диагностики пузырчатых дерматозов) представляют собой измененные форменные частицы шиповатого слоя кожи, обеспечивающий ее прочность и гибкость, и эпителиального слоя слизистых оболочек. Они характеризуются крупным ядром, которое занимает весь объем клетки, и узким ободком базофильной цитоплазмы. Их наличие наблюдается при дегенеративном разрушении межклеточных мостиков (акантолизе). Этот патологический процесс является клиническим признаком редкого дерматологического заболевания – пемфигуса, сопровождающегося появлением на кожных и слизистых покровах пузырей с экссудатом, которые стремительно увеличиваются и сливаются между собой, доставляя человеку немало страданий.

Достоверной этиологической причины развития заболевания до настоящего дня не установлено. Многие специалисты считают, что пузырчатка относится к аутоиммунным патологиям. Существует несколько разновидностей пемфигуса, однако вне зависимости от формы недуг имеет схожие клинические проявления. Отсутствие рациональной терапии приводит к поражению почек, печени и сердца.

Эрозии слизистых оболочек и/или кожи являются поверхностным дефектом эпителиального слоя, который не затрагивает базальную мембрану клеток. Причинами их возникновения могут быть ссадины, дистрофические и воспалительные процессы. Для своевременного диагностирования пузырчатки и клинического разграничения с другими дерматологическими заболевания практикующие специалисты считают целесообразным проводить цитологическое исследование.

Важность исследования

Кожные поражения в большинстве случаев тяжело переносятся пациентами, так как постоянно соприкасаются с поверхностями, что приводит к усилению воспаления. Если у больного развивается дерматологическое заболевание пемфигус, на поверхности кожи и слизистых оболочек появляются пузыри с экссудативным содержимым, из-за которых начинается боль. Патологию можно контролировать консервативными методами терапии, но для этого требуется установить точный диагноз. При ее подозрении дерматолог назначает серологическое исследование на акантолитические клетки со дна эрозий слизистых оболочек и/или кожи.

Благодаря полученным данным у врача и пациента появляются следующие преимущества:

своевременное выявление точного диагноза;
дифференциальная диагностика с другими отклонениями со схожими симптомами;
возможность начать своевременную терапию, чтобы предупредить такие осложнения, как эрозии, язвы, участки кровотечений, инфекцию;
изучение динамики развития заболевания;
отслеживание стадии ремиссии, чтобы своевременно выявлять обострение и повторно начинать терапию;
оценка качества лечения в процессе его применения и после полного завершения методик.

Пациент должен понимать, что заболевание невозможно устранить полностью. Оно сохраняется пожизненно, периодически обостряясь. Поэтому даже при устранении тяжелых поражений кожи и слизистых важно периодически повторно проходить обследование, выполнять цитологическое исследование на акантолитические клетки, чтобы не допустить тяжелых осложнений.

Назначение на анализ получают у терапевта, педиатра, дерматолога или иного лечащего врача, который заподозрил патологию или проводит ее лечение.

Когда делают анализ?

Проведение исследования необходимо при наличии у пациента эрозий или пузырных высыпаний на кожных и слизистых покровах неустановленной этиологии.

Если природа пузырьков, эрозий на коже и слизистых оболочках уже установлена, тест рекомендовано периодически повторять по показаниям:

оценка эффективности местных средств, физиопроцедур или иных методик, назначенных врачом;
дифференциальная диагностика между различными видами пузырчатки (эритематозная, вульгарная, листовидная, вегетирующая).

Дерматологи советуют проходить повторный цитологический тест, чтобы оценивать состояние эпидермиса и слизистой на клеточном уровне. Так врач сможет полноценно следить за развитием патологии.

Методика проведения анализа

Взятие образца биологического материала производится в условиях лабораторного центра. Квалифицированный специалист выполняет следующие действия:

Осматривает больного и выбирает свежие эрозии.
Берет стерильный кусочек ученической резинки и прикладывает к выбранным дефектам на коже и слизистой.
На предметных стеклах делают мазки-отпечатки – прикасаются резиной к стеклу.
После просыхания биоматериала наносят несколько капель 96% спирта для его фиксации.
Полученные образцы маркируют и направляют для микроскопического исследования.

Окрашивание препарата

После получения биоматериала врач-лаборант проводит отпечаток на предметном стекле. Содержащиеся клетки активно размножаются и подвергаются некрозу, поэтому их требуется зафиксировать в первоначальном состоянии. Для этого используют этиловый спирт, который наносят на отпечаток в объеме 2-3 капли. Стекла сразу же отправляют в лабораторию, где их окрашивают по следующей методике:

стекла устанавливают на рельсы, под которыми располагают емкость, туда может стекать остаток краски или иные жидкости;
наносят выбранный краситель на все предметное стекло, оставляя образцы в таком состоянии на протяжении 20-40 минут;
смывают краситель обычной проточной водой, так как все содержимое уже было зафиксировано и окрашено, дальнейшие изменения появляться не должны.

Окрашивание – обязательный этап цитологического исследования. Клетки в тканях прозрачные, не видимы под микроскопом. После методики они приобретают красный, розовый, фиолетовый оттенок. Тщательно окрашивается вся внутренняя структура, то есть ядро, цитоплазма, органеллы, мембрана. Поэтому цитолог сможет оценить полную структуру клеток, отличить патологические образования.

Готовые окрашенные стекла могут храниться в таком состоянии многие месяцы, не подвергаясь деформациям. Поэтому врач оценит их структуру незамедлительно или по прошествии времени. Также сохраняется возможность сравнения первичного результата с другими образцами, которые будут получены уже после лечения.

Этапы микроскопии

Окрашенные стекла можно сразу исследовать под микроскопом. Для этого используют методику:

стекло устанавливают на предметном столике микроскопа, закрепляют держателем, чтобы оно не сдвигалось при осмотре;
по центру капают масло, сверху устанавливают покровочное стекло, методика позволит лучше рассмотреть клетки при максимальном приближении, оценить их внутреннюю структуру;
выбирают окуляр с максимальным приближением, полностью просматривая препарат слева направо в шахматном порядке (так можно изучить отпечаток ткани, не пропустить ни одной патологической клетки);
просматривают остальные препараты в такой же последовательности.

Готовые результаты указывают на бланке лабораторного исследования в печатном или письменном виде. Все действия выполняет цитолог вручную. Бланк передают лечащему врачу или пациенту, интерпретацией должен заниматься только специалист.

Особенности исследования

Для цитологического исследования препарата, содержащего клетки эпидермиса и слизистой оболочки характерны следующие особенности:

в анализе не применяют автоматический анализатор, все действия проводят вручную, начиная от забора биоматериала, заканчивая приготовлением препарата и микроскопией;
для подтверждения диагноза готовят сразу несколько препаратов из разных участков кожи и слизистых оболочек, чтобы рассмотреть больше биоматериала;
стекла оставляют храниться до следующего забора биоматериала, чтобы сравнивать полученные данные;
каждый образец подписывают ФИО пациента, чтобы не перепутать с другими препаратами;
расшифровкой занимается только лечащий врач, он учитывает одновременно полученные данные, анамнез, проявляющиеся симптомы, наследственность, данные других лабораторно-инструментальных тестов;
окрашивание мазка проводят сразу после забора биоматериала, чтобы сохранить полученные клетки в первозданном виде;
биоматериал собирают только с деформированных тканей, так как в других участках кожи и слизистых клетки могут сохраняться нормальном виде, не подвергаться заболеванию.

Исследование проводит опытный цитолог, поэтому данные получаются достоверными.

Расшифровка анализа

Отсутствие в исследуемых мазках-отпечатках со дна эрозий акантолитических клеток и наличие у пациента схожих с пузырчаткой клинических симптомов может наблюдаться при лейкоплакиях, травматических эрозивных поражениях, красном плоском лишае и пр. Наличие на дне эрозий клеток Тцанка, имеющих характерную морфологию, может свидетельствовать о вирусных инфекциях, туберкулезном поражении, пузырчатке.

Цитология: акантолитические клетки эрозий