Антинейтрофильные антитела

Антитела к цитоплазме нейтрофилов (ANCAс,ANCAp)

Определение антител к цитоплазме нейтрофилов, играет важнейшую роль в дифференциальной диагностике заболеваний с аутоиммунным компонентом, в частности различных васкулитов.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: венозная кровь
• Синонимы (rus): АНЦА IgA, иммуноглобулины класса А к цитоплазме нейтрофилов.
• Синонимы (eng): anti-neutrophil cytoplasmic antibody (ANCA), IgA.
• Метод исследования: Непрямая реакция иммунофлюоресценции.
• Сроки выполнения: 14 дней

Антинейтрофильные антитела

Антитела к цитоплазме нейтрофилов – группа молекул, вырабатываемых собственной иммунной системой организма к структурным компонентам клеток нейтрофилов и моноцитов. Взаимодействие данных антител с указанными клетками приводит к выбросу из последних, большого количества биологически активных веществ, оказывающих повреждающее воздействие на расположенные рядом ткани и сосуды.

Антитела к нейтрофилам, при определении их методом непрямой иммунофлюоресценции, определяются в виде полного окрашивания всей цитоплазмы клетки (ANCAc) или небольшой области в районе ядра клетки (ANCAp). Антинейтрофильные антитела, как правило, играют важнейшую роль в развитие различных васкулитов, в частности гранулематоза Вегенера, поражающем сосуды мелкого калибра и проявляющимся риносинуситами, идиопатической гематурией и пневмониями.

Чувствительность данного метода для системных васкулитов очень высока – более 80%. Частота встречаемости ложноположительных результатов у здоровых людей менее 5%, у пациентов с различной патологией – около 20%.

Важность исследования

Геморрагический васкулит – это тяжелая патология, сопровождающаяся воспалением эндотелия небольших сосудов. Чаще всего подобное состояние спровоцировано образованием антител к цитоплазме нейтрофилов. Если у пациента появляются симптомы воспаления сосудов, важно своевременно провести лабораторную диагностику, чтобы определить первопричину. Только так можно назначить патогенетический метод терапии, который поможет держать болезнь под контролем.

Анализ на определение антител к цитоплазме нейтрофилов проводят для достижения следующих целей:

• определение точной причины, вследствие которой у пациента воспаляются стенки сосудов небольшого размера;
• определение степени тяжести патологии, которая зависит от уровня нарастания определенного вида антител;
• дифференциальная диагностика между аутоиммунной и другой природой воспалительного поражения (например, на фоне приема лекарств или действия вируса);
• подбор вида лекарственных средств, с этой целью важно выявить аутоиммунную природу патологии, чтобы у врача была возможность назначить иммуносупрессивные средства, не допускающие выработку аутоантител;
• оценка результата лечения, так врач может менять виды препаратов, их дозировки, назначать более радикальные тактики;
• составление прогноза развития болезни.

Назначение на исследование получают от гастроэнтеролога, проктолога, гематолога, ревматолога или иного лечащего врача, который выявил негативные симптомы. Он же должен заниматься расшифровкой полученных сведений. Важно помнить, что результаты неспецифичны для одной конкретной болезни. Они могут встречаться при многих аутоиммунных патологиях. Поэтому при определении диагноза врач дополнительно учитывает проявляющиеся признаки, жалобы со слов пациента, анамнез, наследственность и многие другие факторы.

Для чего необходим анализ

Диагностическое исследование необходимо для получения важной информации:

• определение причин сыпи под кожей, проявляющейся в виде пурпуры, а также артралгии, абдоминальной боли;
• постановка дифференциального диагноза аутоиммунной пурпуры и нефропатии, развивающейся вследствие иммуноглобулинов класса А;
• определение диагноза геморрагического васкулита, который чаще всего образуется вследствие продукции антител к цитоплазме нейтрофилов.

Антитела к цитоплазме нейтрофилов могут вызывать не только сосудистые патологии, но и поражение внутренних органов. Например, часто развиваются признаки поражения кишечника, что сопровождается выделением крови вместе с калом. Подобное состояние встречается при колите разной природы, которые лечатся отличающимися методами. Поэтому так важно своевременно провести анализ на наличие аутоиммунных антител.

Характеристика разных видов антител

Выделяют разные виды антител к цитоплазме нейтрофилов, каждый из которых обладает своими особенностями.

1. IgM. Этот вид иммуноглобулинов не имеет важности в клиническом проявлении заболевании, поэтому сведения о них не определяют.
2. IgG. Этот класс иммуноглобулинов чаще всего встречается при наличии синдрома Гудпасчера, болезни Вегенера. Реже их определяют при других аутоиммунных патологиях.
3. IgA. Это наиболее важный клинический маркер аутоиммунной патологии, связанный с геморрагическим васкулитом. При их обильном накоплении начинается поражение нейтрофилов и моноцитов, которые при разрушении выделяют биологически активные вещества, поражающие только мелкие сосуды. В поражение вовлекаются капилляры, венулы, артериолы. На данный момент большого количества информации о данном виде антител нет, но на основании их выявления можно предположить наличие геморрагического васкулита, который подтверждается при помощи других лабораторно-инструментальных тестов.

Наибольшую важность предоставляют антитела к цитоплазме нейтрофилов IgA. Поэтому при проведении непрямой реакции иммунофлюоресценции лучше всего исследовать именно этот класс иммуноглобулинов.

Показания к назначению анализа на антинейтрофильные антитела

1. Дифференциальная диагностика васкулитов системного характера и идиопатического гломерулонефрита.
2. Дифференциальная диагностика заболеваний желудочно-кишечного тракта с аутоиммунным компонентом (болезнь Крона, неспецифический язвенный колит).
3. Оценка эффективности лечебных мероприятий при указанных видах патологии.

Подготовка к исследованию на антинейтрофильные антитела

Пациенту перед сдачей анализа на антитела к цитоплазме нейтрофилов рекомендуется придерживаться следующих правил:

1. анализ проводится утром, натощак;
2. с последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов;
3. исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала.

Для получения достоверных данных рекомендуется проходить этапы подготовки по совету врача:

• запрет употребления любых новых препаратов, о которых не был осведомлен лечащий врач (многие из них могут повлиять на состав крови, активность иммунитета, особенно если это сильнодействующие средства);
• отсутствие тяжелой физической нагрузки, сильного стресса накануне сдачи крови;
• отсутствие проведения инструментальных анализов, сопровождающихся облучением за 7-10 дней (рентгенография, компьютерная или магнитно-резонансная томография);
• запрет курения непосредственно перед сдачей крови.

После сбора крови медсестрой запреты устраняются. Но пациент должен выждать период до получения результатов, чтобы приступить к терапии.

Особенности исследования

Диагностику проводят с помощью непрямой реакции иммунофлюоресценции, для которой характерны следующие особенности при выявлении аутоантител:

• показатели определяют в венозной крови, но для точности исследования из нее получают лишь сыворотку, где расположены все иммуноглобулины;
• в плазме содержится большое количество иммуноглобулинов, поэтому для выделения требующегося вида применяют специальный реактив, после взаимодействия с которым образуются комплексы антиген-антитело, их идентифицирует анализатор;
• в качестве анализатора применяют иммунофлюоресцентный микроскоп, оценивающий наличие или отсутствие иммунных комплексов по специфическому свечению благодаря содержанию метки на поверхности антигенов из реактива;
• тест выполняется в течение трех дней, но при запросе проведении срочного анализа данные можно получить в течение суток после сбора биоматериала.

Анализ специфичен к выявлению именно титра антител к цитоплазме нейтрофилов. Данные всегда получаются достоверными и точными.

Метод исследования

Непрямая реакция иммунофлюоресценции для выявления антител против нейтрофилов проводится по этапам.

1. Сбор крови. Процедуру выполняет медсестра. Первоначально на плечо накладывают жгут. Место прокола дезинфицируют спиртом, вводят иглу, через которую кровь сразу поступает в пробирку. На ее дне содержится антикоагулянт, не допускающий образования сгустка.
2. Получение сыворотки. Для этого используют центрифугирование на высоких оборотах. Другой метод – добавление разделительного геля. После его добавления плазма самостоятельно выходит на поверхность.
3. Смешивание компонентов. Соединяют 1 мл плазмы и реагент с антигенами. После инкубации в жидкости образуются комплексы антиген-антитело. На их поверхности содержится флюоресцентная метка, приводящая к специфическому свечению во время микроскопии.
4. Микроскопия. Жидкость размещают под флюоресцентным микроскопом. Это аппарат, благодаря которому можно выявить наличие или отсутствие антитела, а также подсчитать их концентрацию.

После завершения методики данные распечатают на бланке. В нем содержатся показатели пациента и референсные значения (пределы нормы). Так пациент может сравнить показатели самостоятельно, но лучше обратиться с ними к врачу, который сможет правильно интерпретировать данные.

Нормальные значения

Референсные показатели в норме: титр антител менее 1:40. Любое повышение расценивается как положительный результат.

Интерпретация результатов

Интерпретаций полученных данных, должен заниматься только лечащий врач. Самостоятельная постановка диагноза и назначение самолечения не рекомендуется!

Повышение титра антител возможно в следующих случаях:

1. Васкулиты, ассоциированные с продукцией антител к цитоплазме нейтрофилов: узелковый периартериит, гранулематоз Вегенера, микроскопический полиангиит.
2. Поражения сосудов на фоне системной аутоиммунной патологии (ревматоидный артрит и системная красная волчанка)
3. Аутоиммунная патология желудочно-кишечного тракта.
4. В некоторых случаях, повышение антинейтрофильных антител возможно и у здоровых людей.

Диагностическая ценность определения антинейтрофильных антител, значительно повышается при сочетании его с клиническим обследованием больного и проведением дополнительных методов обследования, направленных на дифференциальную диагностику предполагаемых заболеваний.