Анализ кала на микрофлору с определением чувствительности к антибиотикам

Микробиологическое исследование, при котором выявляют качественные и количественные нарушения микрофлоры кишечного тракта и восприимчивость патогенных микроорганизмов к антибиотикам.

Подготовка к анализу кала на микрофлору

Пациентам рекомендуется перед исследованием кала на микрофлору соблюдать следующие правила:

за 3 дня до исследования исключить острую пищу, алкоголь;
от момента последнего принятия пищи до взятия материала должно пройти не менее 8 часов;
материал забирается до начала лечения антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами или через 14 дней после последнего приема препарата.

Для исследования берут фекалии, полученные естественным путем. Ложечкой следует забрать 1- 3 г фекалий и поместить их в специальный стерильный контейнер. Материал брать из участков, где обнаруживается слизь и/или кровь. Не допускается попадание мочи в пробу. Не допускается сбор материала с памперса.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: кал.
Синонимы (rus): условно-патогенные микроорганизмы, условно-патогенные возбудители, условно-патогенные бактерии, условно-патогенные микробы, анализ на дисбактериоз, анализ на УПФ (условно-патогенную флору).
Синонимы (eng): antibiotic susceptibility, opportunistic flora, opportunistic pathogens, opportunistic organisms.
Метод исследования: микробиологический метод.
Сроки выполнения: 5 дней

Что позволяет выявить анализ на микрофлору кишечника?

Определяют возбудителя инфекционного заболевания в ЖКТ. С определением восприимчивости выделенных условно-патогенных микробов к антибактериальным препаратам, которые в дальнейшем будут назначены пациенту.

Информация об исследовании кала на микрофлору.

Условно-патогенные бактерии – это микроорганизмы, которые в норме должны присутствовать в умеренном количестве. При определенных условиях их количество возрастает, превышая допустимое значение, что приводит к возникновению заболеваний.

Для чего назначают данное исследование?

Посев каловых масс предназначен для диагностики болезней, которые вызваны условно – патогенными микробами и для наблюдения эффективности проводимой терапии для их уничтожения.

Кому назначают анализ кала на микрофлору с определением чувствительности к антибиотикам?

Лицам при подозрении на наличие кишечных заражений, вызванных патогенной флорой.
При дисбактериозе кишечника.
Диагностирования заболеваний ЖКТ.
После длительного лечения антибактериальными средствами, иммунодеприсантами, химиотерапевтическими препаратами и глюкокортикостероидами.
Если есть аллергия, которая трудно поддается консервативному лечению.
При планировании хирургического вмешательства, людям предрасположенных к дисбактериозу.
При наличии гнойных инфекции, не поддающихся излечению.
При продолжительном времени выздоровления после перенесенных острых кишечных инфекциях.
При симптомах дисфункции кишечника.

Важность анализа

Микробиологическое исследование кала на микрофлору с определением чувствительности к обычному спектру антибиотиков рекомендуется проводить при наличии симптомов патологии ЖКТ. К ним относят диарею, запор, метеоризм, боль внизу живота. Также тест можно назначать профилактически, например, если у пациента в анамнезе ранее был выявлен дисбаланс микрофлоры. С помощью теста вычисляют соотношение полезных, условно-патогенных и болезнетворных микроорганизмов.

Важность анализа опосредована следующими факторами:

обнаружение уровня лактобацилл и бифидобактерий, которые способствуют перевариванию пищевого комка, улучшают проникновение питательных веществ в кишечник;
оценка соотношения условно-патогенных бактерий, которые не должны превышать границы нормы, чтобы не спровоцировать расстройство пищеварения, нарушение формирования стула;
вычисление патогенных бактерий, которые в норме должны быть в минимальном количестве или полностью отсутствовать, чтобы не спровоцировать инфекционный процесс, влияющий на организм системно (к ним относят сальмонеллы, шигеллы, клостридии и другие микроорганизмы);
определение полного перечня антибиотиков, к которым выявленные патогенные микроорганизмы имеют повышенную чувствительность, из-за чего врач сможет назначить наиболее эффективные препараты;
выявление препаратов с отсутствием или низкой чувствительностью, которые применять недопустимо, иначе болезнь будет прогрессировать, вызывая осложнения;
назначение лекарств с учетом анамнеза, к которым у пациента наблюдается высокая чувствительность, но отсутствие побочных реакций;
определение эффекта от завершенной терапии, после которой соотношение микрофлоры должно стабилизироваться, прийти в пределы нормы;
дифференциальная диагностика нарушения микрофлоры кишечника с другими заболеваниями, вызывающими схожие симптомы (колит, дивертикулит).

Исследование назначает педиатр, терапевт, гастроэнтеролог или иной специалист, который заподозрил диагноз.

Сбор, хранение и транспортировка

Для предотвращения ложных результатов, получения достоверных данных придерживаются следующих правил по сбору биоматериала:

заранее покупают стерильный контейнер из аптеки, предназначенный для сбора фекалий (нельзя использовать посторонние емкости, в них сохраняются посторонние микроорганизмы и вещества);
перед сбором фекалий подмывают наружные половые органы бактерицидным мылом, уничтожающим микроорганизмы с поверхности кожи и слизистой оболочки;
собирают небольшое количество биоматериала, так как из всего образца врач отбирает только 1 г;
после сбора контейнер с калом плотно закручивают крышкой, это предотвратит распространение микроорганизмов внутрь образца.

До передачи фекалий в лабораторию придерживаются правил хранения:

при комнатной температуре кал может храниться до 1 часа, температурный режим должен составлять не более 25°;
максимальный период хранения составляет 2 часа, но тогда требуется размещать образец на дверце холодильника с температурой 4-5°;
при хранении недопустимо распространение прямых солнечных лучей на контейнер.

Транспортировать биоматериал требуется при температуре не выше 25°, при условии отсутствия попадания прямых солнечных лучей. От момента сбора до передачи врачу-лаборанту должно проходить не более 2 часов.

Ход анализа

Микробиологическое исследование кала на микрофлору с определением чувствительности к обычному спектру антибиотиков проходит многоступенчато. Это поможет определить точный состав микрофлоры и перечень лекарств, которые будут записаны на бланке в виде таблицы.

Посев

Как только биоматериал получен, приступают к последовательным этапам посева:

подготовка чашки Петри с питательной средой на основе агар-агара;
распределение небольшого количества фекалий по поверхности питательной среды тонким, равномерным слоем, чтобы добиться одинакового роста по всей области;
перемещение чашки Петри с образцом кала в инкубатор, повышение температуры до 37°, чтобы спровоцировать обильный рост микрофлоры в короткие сроки;
ожидание роста бактерий, этот период может составлять 3-5 дней.

После посева появляются белые или серые круги, внутри которых можно обнаружить вкрапления в виде точек. Это и есть колонии бактерий.

Приготовление препарата

Для микроскопирования предварительно готовят препарат из выросших микроорганизмов.

Этапы выполнения:

лабораторными инструментами переносят выросшие бактерии на центральную зону предметного стекла;
наносят краситель, так как без предварительного окрашивания бактерии будут прозрачными, поэтому рассмотреть их невозможно;
после 20-40 минут краситель смывают физраствором.

Посередине предметного стекла останется фиолетовое пятно, которое можно рассматривать под микроскопом, чтобы оценивать состав микрофлоры.

Микроскопирование

Размещают препарат под микроскопом, устанавливая окуляр с самым большим приближением. Перемещают предметное стекло, рассматривая 10 полей зрения. Оценивают состав микрофлоры и количество бактерий. Данные заносят в таблицу.

Чувствительность к антибиотикам

В ходе лабораторного анализа выявляют степень чувствительности к стандартному перечню антибиотиков.

Действия выполняют поэтапно:

пропитывают диски разными группами антибиотиков;
прикладывают пропитанные диски на питательную среду с колониями бактерий;
оценивают степень уничтожения бактерий.

При высокой чувствительности бактерии полностью уничтожаются. Если она средняя, остается часть микрофлоры. О резистентности микроорганизмов свидетельствует полное сохранение бактерий.

В конце анализа заносят данные в журнал. Напротив выявленных микроорганизмов указывают полученные данные с чувствительностью к антибиотикам. Готовый бланк передают лечащему врачу для расшифровки и назначения лечения по необходимости.

Нормы анализа на микрофлору

В норме после проведенного исследования приходит отрицательный результат – отсутствует рост патогенной микрофлоры.

Присутствуют лактобактерии не меньше 108, бифидобактерии, не менее 108, кишечная палочка – не более 1% от единого числа микроорганизмов. Кандида не более 103, лактозонегативные энтеробактерии (протей, энтеробактерии, унтеробактерии, клебсиеллы) до 105. кокковые формы до 106, клостридии до 105.

Что может повлиять на результат?

Замедление транспортировки иследуемого материала в лабораторию.
Бактерионосительство.
Прием антибиотиков, химиопрепаратов.

Кал на микрофлору с чувствительностью к АБ