HLA-типирование 1 класса

HLA-типирование 1 пациента (I класс) по локусам А и В


Человеческие лейкоцитарные антигены, или HLA, что расшифровывается как Human Leukocyte Antigens, представляют собой комплекс генов, отвечающих за распознавание иммунной системой человека собственных и чужеродных белков. Они расположены на 6-ой хромосоме и подразделяются на два класса – I и II, к первому из которых относят локусы А, В, С, ко второму – D, состоящему, в свою очередь, из сублокусов. Антигены II класса представляют преимущественно клетки иммунной системы, в то время, как I класс антигенов представлен практически всеми клетками, содержащими ядра. Отличительной чертой HLA-генов является огромное разнообразие вариаций (в пределах 13,5 тыс.).

Роль HLA-типирования в трансплантологии


О существовании поверхностных антигенов стало известно еще в 1952 году. Тогда же начали изучать роль клеток в реакциях иммунной системы, распознавании собственных и чужих клеток. HLA-система обнаружена у всех позвоночных и получила второе название «главный комплекс гистосовместимости».

Исследование комплекса гистосовместимости позволяет трансплантологам определиться с совместимостью донорских органов при пересадке реципиенту. С появлением такого анализа появляется вероятность в большей степени оценить риски операции по трансплантации.

При трансплантации органов возможны четыре категории отторжения донорского органа. Оно может быть сверхострым (начинается сразу после операции), острым гуморальным (развивается в течение 4 недель), острым клеточным (до полугода) и хроническим с постепенной дисфункцией трансплантируемого органа. Все виды отторжения в той или иной степени связаны с иммунной системой организма человека, которая атакует трансплантируемый орган как чужеродный. Согласно статистике при положительных результатах HLA-типирования вероятность благополучного исхода операции по пересадке органов составляет 90 %.

Методика проведения анализа


Для проведения HLA-типирования используют два основных метода – серолоический и ПЦР (полмеразной цепной реакции).

Первый метод, иначе называемый лимфоцитотоксическим тестом, основан на изолировании лимфоцитов сыворотки крови пациента с последующим их взаимодействием с HLA-антигенами. Лимфоциты, вступившие в реакцию, гибнут, а живые подвергают окраске и оценивают по специальной шкале. Результат оценивается по количеству погибших лимфоцитов, резкоположительный означает, что в них присутствует исследуемый антиген. При проведении анализа кровь не должна быть замороженной. Это можно отнести к недостаткам метода.

ПЦР метод имеет более высокое разрешение. Он основан на выделении геномной ДНК и распознавании праймерами специфичных участков, которые затем многократно удваиваются и исследуются с помощью гель- или электрофореза.

HLA-типирование назначают при подборе донорского органа, обследовании перед операцией по трансплантации органа.