Исследование на HHV-6 (вирус герпеса – 6) количественный

Вирус герпеса человека 6 типа (HHV-6, ВГЧ-6) был идентифицирован и изучен не так давно – 30 лет назад. Он представлен двумя разновидностями ДНК содержащих вирусов – HHV-6A, HHV-6B. Чаще всего идентифицируется ВГЧ-6В. Он вызывает энцефалит, мононуклеоз, лихорадку новорожденных с судорожным синдромом, рассеянный склероз и т.д. ВГЧ-6А определяется у больных с ВИЧ/СПИД.

Сложность диагностики патологий, вызванных герпесвирусом в том, что заболевания, как правило, протекает бессимптомно, а инфекционный агент паразитирует внутри клеток. Вирус герпеса - 6 обладает длительным инкубационным периодом, может в латентной форме существовать длительное время в клетках Т-лимфоцитов, что несет реальную угрозу реципиенту при переливании крови, пересадке донорских органов и тканей. Поэтому к диагностическим методикам предъявляются особые требования.

Порядка 98% людей на всем земном шаре являются носителями герпетических инфекций. Выделяют 8 разновидностей вируса герпеса, поражающих человеческих организм, которые отличаются между собой составом генома, антигенной структурой, биологическим и иммунологическим свойствами. Одним из наиболее распространенных вирусов герпеса является герпесвирус 6 типа.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: Ликвор, мазок из зева (ротоглотки), слюна, биоптат (биоптат лёгких, печени, ЖКТ), венозная кровь.
Синонимы (rus): ВГЧ-6, вирус герпеса 6 типа, герпес-вирус 6 типа, РТ-ПЦР.
Синонимы (eng): DNA [Real-time PCR], HHV-6.
Метод исследования: Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Сроки выполнения: 4 дня

Пути заражения HHV6

Источник инфекции – человек, в том числе болеющий патологией в латентной форме. Герпесвирус 6 типа содержится в слюне, в связи с чем основным путем заражения является воздушно-капельный. Инфицирование может происходить от больной матери ребенку (при прохождении через родовые пути, в процессе кормления грудью). Заражение возможно при гемотрансфузиях, трансплантации органов или при использовании нестерильных медицинских инструментов.

Особенности вируса герпеса 6 типа

Герпесвирус 6 типа активно размножается в Т-лимфоцитах, поражает большей частью лимфоидную ткань, но при этом может обнаруживаться в тканях печени, мозга, слюнных желез.

Как правило, первый контакт с вирусом герпеса 6 типа случается в детском возрасте (до двух лет), при этом в 70-80% случаев не наблюдается развитие острого заболевания. Инфицирование HHV6 происходит крайне редко.

Герпесвирус 6 типа, существуя в организме человека, может годами никак себя не проявлять и активироваться только при снижении иммунных сил.

Иммунологическая диагностика вируса герпеса 6 типа затруднительна, поскольку специфические тела к возбудителю патологии обнаруживаются в крови у подавляющего большинства взрослых. В этой связи наибольшую диагностическую ценность представляет метод ПЦР, при котором в исследуемом материале определяется вирусная ДНК.

Когда показано проведение исследования

Часто возникающие (более 9 раз за год) простудные заболевания области носоглотки или же характеризующиеся длительным, отягощенным течением.
Рецидивирующие хронические инфекционные процессы, в особенности возникающие при проведении адекватной терапии с использованием антибактериальных препаратов.
Лимфопролиферативные патологии, включая протекающее в отсутствии иных симптомов увеличение лимфоузлов.
Частая слабость, повышенная утомляемость в отсутствии проявлений заболевания.
Иммунодефицитные состояния.
Симптомы герпетической инфекции (повышение температуры тела, пузырьковые высыпания).
Диагностика детских инфекций, сопровождающихся сыпью и поднятием температуры).
Диагностика инфекционного мононуклеоза в случае отрицательного результата тестирования на вирус герпеса 4 типа.
Планирование беременности.
Обследование пациентов до и после трансплантации тканей и органов.
Контроль эффективности противовирусной терапии.
Профилактическое обследование.

Виды методов исследования на вирус герпеса 6 типа

Наличие Вируса герпеса 6 типа определяется несколькими методами:

1. Методом реакции агглютинации (обнаружение белков вируса) :

иммунопироксидазный;
иммунофлюорисцентный;
иммунноэлектронная микроскопия;

2. Методы генодиагностики (обнаружение генома вируса):

ИФА (иммуноферментный анализ);
РИА;
ПЦР (полимеразная цепная реакция) и др.

Наиболее популярными и информативными методами генодиагностики являются ПЦР и ИФА. ИФА тест определяет количественный состав иммуноглобулинов (lgG) к HHV-6. Суть метода в реакции антигенов возбудителя ВГЧ-6 и антител в сыворотке крови человека. При добавлении к смеси специального субстрата цвет изменяется. По его насыщенности судят о количестве антител в образце, который исследуют. Анализ показывает тип антигенов (lgM и lgG). В начальной стадии заболевания образуются lgM, при прогрессировании – антигены класса lgG.

Тест ПЦР выявляет остатки ДНК и РНК вируса. Для исследования берут биологические жидкости (кровь, слюна, околоплодные воды и т.д.). Высокая информативность теста обусловлена выявлением части ядерной ДНК специфичной каждому возбудителю. Метод амплификации позволяет растиражировать даже единичные цепочки, что гарантирует обнаружение и идентификацию вируса в исследуемом образце. Метод требует специального оборудования и обученных специалистов.

Правила подготовки к анализу на вирус герпеса

Забор крови производится в пробирку с фиолетовой крышкой (ЭДТА) до метки. Специальной подготовки не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

Cбор слюны должен проводиться строго до начала применения антибактериальных и химиотерапевтических препаратов или не ранее, чем через 10-14 дней после их отмены, и не ранее чем через один месяц после применения антибиотиков. Сбор слюны у детей можно проводить стерильным шприцем объемом 2-5 мл (без иглы) из защечного пространства в пробирку типа «Эппендорф». Следует собрать не менее одного мл слюны.

При подготовке к сбору слюны необходимо:

в течение 6 часов до получения биологического материала отказаться от проведения орошения ротоглотки лекарственными средствами и не принимать медикаменты, предназначенные для рассасывания;
в день сбора слюны не чистить зубы, не использовать средства, обеспечивающие свежесть дыхания, в том числе жевательную резинку;
не курить за полчаса до проведения анализа;
непосредственном перед сбором биологического материала основательно прополоскать полость рта теплой кипяченой водой (рекомендуется повторить процедуру трижды);
оптимальное время для сбора слюны – утро, сразу после пробуждения.

Расшифровка результата анализа

Каждая лаборатория устанавливает свой критериальный уровень, который указывается в бланке исследования. Если результат выше уровня, то тест положительный и ставится отметка в бланке «выявлен», если количество ниже – то тест отрицательный и возбудитель «не выявлен».

При анализе результатов иммуноферментного метода делают отметку «положительный» или «отрицательный». Отрицательный анализ с точностью 98% свидетельствует об отсутствии возбудителя. При положительном результате назначают повторные анализы ИФА и ПЦР для исключения ложноположительного результата.

Анализы назначают для определения:

Вида и наличия инфекционного агента;
Первичной инфекции (скрытая, острая, вирусоносительство);
Вторичной инфекции (хроническая, реинфекция, обострение или рецидив).

Полученные результаты исследования на герпесвирус 6 типа должны расшифровываться только лечащим специалистом. Для обеспечения достоверности полученных итоговых значений рекомендуется повторное проведение анализа. Постановка диагноза проводится на основе данных ПЦР-диагностики, с учетом общей клинической картины, анамнеза и жалоб пациента.

Интерферирующие факторы

Получение ложноотрицательных результатов может быть обусловлено:

проведением противовирусной терапии, снижающей возбудителя в подлежащем исследованию образце биоматериала;
свойствами герпесвируса 6 типа поражать клетки, не выходя за их границы.

Важность диагностики вируса герпеса 6 типа

HHV6 даже в отсутствии характерных проявлений представляет серьезную угрозу для человеческого организма, в связи с чем важно своевременного его распознать и начать проведение необходимой терапии. Данный вирус может провоцировать развитие ряда патологий или выступать в качестве сопутствующего фактора развития инфекционного или воспалительного процесса:

внезапная экзантема у детей (преимущественно у новорожденных). Проявляется поражением кожи, интоксикацией, высокой лихорадкой;
синдром хронической усталости;
инфекционный мононуклеоз, не связанный с герпесом 4 типа (вирусом Эпштейна-Барр);
отдельные виды вирусных энцефалитов;
гистиоцитарный некротический лимфаденит.

Кроме того, выделяются также патологии, ассоциированный с инфекцией герпесвируса 6 типа. К их числу относятся злокачественные лимфомы: болезнь Ходжкина, неходжкинская лимфома, дерматопатическая лимфаденопатия, В-клеточная лимфома, Т-клеточная лейкимия). Также вирус герпеса 6 типа считается кофактором иммунодефицитных состояний, в том числе СПИДа.

Исследование для оценки эффективности проведенной терапии

Количественное определение ДНК герпесвируса 6 типа позволяет контролировать проведенную терапию, оценивать ее результативность. Исследование рекомендуется проводить по прошествии 30 суток с момента завершения приема противовирусных препаратов. На эффективность терапии указывает снижение ДНК вируса герпеса в образце. Повторный анализ следует проходить в том же медицинском лабораторном центре.

Вирус герпеса 6 типа