Онкомаркер p16ink4a

Кошурин Дмитрий Валерьевич
Автор статьи: Кошурин Дмитрий Валерьевич Врач лабораторной диагностики, Главный врач МКЦ "Проксима",
Срок исполнения
(рабочие дни):

до 5 дн.
Код услуги:
M03
Цена:
5490 ₽*

* Взятие биоматериала оплачивается отдельно

Определение онкомаркера p16ink4a с использованием жидкостной цитологии

Метод жидкостной цитологии - это исследование, позволяющее выявлять рак шейки матки, вызываемого вирусом папилломы человека (ВПЧ) на ранней стадии развития.

Характеристики исследования:

  • Тип биоматериала: Аспират из полости матки.
  • Синонимы (rus): Белок p16INK4a; иммуноцитохимическое исследование.
  • Синонимы (eng): Оncoprotein p16INK4ain; immunocytochemical study.
  • Методы исследования: Иммуноцитохимический метод + жидкостная цитология.

Эффективный скрининг для выявления рака шейки матки требует достоверных методов исследования. Жидкостная цитология, в отличие от обычной, имеет преимущество, которое состоит в большей информативности. Для исследования используется не мазок на стекле, а сконцентрированная в результате отмывания и центрифугирования масса клеток эпителия.

На следующем этапе выявление с помощью цитохимического окрашивания белка-онкомаркера p16ink4a позволяет дифференцировать вид дисплазии – неопухолевую или онкогенную. Первая может быть следствием воспаления, а вторая имеет высокий риск злокачественного роста и требует соответствующего лечения.

Жидкостная цитология

Использование метода жидкостной цитологии дает возможность увеличить достоверность диагностики. Препарат для исследования представляет собой слой отмытых и сконцентрированных клеток, поэтому улучшаются возможности их визуализации под увеличением. В полученных препаратах на следующем этапе иммуноцитохимического исследования можно обнаружить любые белки, в том числе, маркеры онкологического роста.

Белок-онкомаркер p16ink4a

В норме протеин p16ink4a в клетках эпителия продуцируется в незначительных количествах и при анализе не определяется. При заражении ВПЧ нарушается регуляция выработки этого белка, так как вирус внедряется в ядро клетки и изменяет процессы ее деления и синтеза веществ. Увеличение экспрессии p16ink4a свидетельствует о неконтролируемой пролиферации эпителиальных клеток, что может считаться началом онкологического процесса. Поэтому p16ink4a является непрямым онкомаркеромдля выявления риска рака шейки матки.

Выявляется с помощью цитохимического окрашивания препарата эпителиальных клеток из цервикального канала.Даже при измененной кольпоскопической картине отрицательный результат анализа на p16ink4a позволяет сделать вывод о неопухолевом характере дисплазии. Положительный результат требует назначение лечения для того, чтобы избежать перерождения дисплазии в рак.

Требования к забору материала

Забор, хранение и транспортировка материала для жидкостной цитологии требует тщательности и соблюдения определенных условий.

Наличие слизи в пробе может исказить результат, поэтому шейку матки от нее предварительно освобождают. Вращением специальной одноразовой щеточки в цервикальном канале забирают клетки эпителия, затем их переносят в контейнер с жидкостью для хранения и транспортировки.

Для предупреждения разрушения клеток пробу нельзя замораживать и хранить при комнатной температуре, должна соблюдаться температура от +4 до +8 градусов Цельсия.

Использование определения белка p16ink4a для диагностических целей актуально для женщин всех возрастных групп. Информативность метода жидкостной цитологии для оценки риска возникновения рака шейки матки делает его более предпочтительным.

Подготовка

Для получения максимально точных данных перед исследованием требуется пройти этапы подготовки:

  • тест сдают только через 5 дней после завершения менструального цикла, раньше его проводить нельзя, так как образец будет видоизменен (позже анализ сдавать можно, но не позднее, чем за 7 дней до наступления менструального цикла);
  • за трое суток до анализа не допустим половой акт, применение местных антисептиков, средств гигиены, лубрикантов, спринцеваний или использование любых вагинальных препаратов;
  • недопустимо применение системных или местных антибактериальных средств за неделю до теста;
  • последнее мочеиспускание должно осуществляться за 3 часа до анализа;
  • недопустимо наличие явных инфекционных и воспалительных процессов во влагалище, требуется дождаться полного выздоровления или затухания обострения.

Важно придерживаться всех этапов подготовки, иначе полученные данные от анализа будут недостоверными, потребуется повторно повторять тест.

Показания

Основное показание для проведения теста – определение онкомаркера p16ink4ac при профилактическом отслеживании или подозрении рака шейки матки. 

Обычно тест назначают женщинам по следующему графику:

  • начало ведения половой жизни, но не ранее 21 года (если провести анализ раньше этого периода, можно получить ложноположительные данные вследствие влияния на эпителий большого количества половых гормонов);
  • ежегодное тестирование женщин от 21 до 65 лет;
  • диагностика пациенток от 65 лет и более 1 раз в 3 года, но с учетом получения отрицательных результатов каждого теста до этого возраста;
  • ежегодная диагностика пациенток от 65 лет, если ранее тест был положительным или пациентка проходила лечение злокачественного новообразования.

Допустимо проведение анализа внепланово. Например, если женщина планирует беременность или установку внутриматочной спирали, ее менструальный цикл был нарушен, на общем осмотре определили гиперплазию эпителия.

Ход анализа

После получения биоматериала выполняют последовательные этапы теста в лабораторном кабинете:

  • цельный биоматериал не требуется, так как в нем присутствует масса посторонних элементов, затрудняющих выявление атипичных клеток, поэтому предварительно выполняют отмывание, а затем центрифугирование (благодаря этому этапу остаются только эпителиальные клетки, которые можно рассмотреть под микроскопом без затруднений);
  • получают образец с эпителием, чтобы установить лишь клетки, которые могут быть подвержены белку онкомаркера p16ink4ac или здоровые, нормальные элементы;
  • эпителиальные клетки размещают на предметном стекле, фиксируют спиртом, чтобы не допустить их размножения или гибели;
  • последовательно наносят разные виды красителей, так как без них клетки прозрачные, не могут быть рассмотрены под микроскопом;
  • смывают красители физраствором или дистиллированной водой, сушат препарат на открытом воздухе;
  • устанавливают стекло по центру микроскопа, фиксируют держателем;
  • первоначально просматривают содержимое под дальним приближением, оценивая общую структуру клеток;
  • переводят окуляр на максимально близкое приближение, применяя специальное масло для улучшения видимости;
  • рассматривают препарат в 10 полях зрения, продвигая окуляр в шахматном порядке (если обнаружены патологически измененные клетки, просматривают весь препарат, подсчитывая их количество).

Все выявленные данные заносят в бланк лабораторного анализа. Его передают пациенту. При выявлении любых отклонений консультируются с лечащим врачом. Он соотнесет эти данные с общим смотром, анамнезом, может назначить дополнительные лабораторно-инструментальные тесты. Только так можно своевременно выявить патологию, предупредить обширный злокачественный процесс, различные осложнения.

Важность исследования

Рак шейки матки – это одно из самых распространенных и одновременно опасных гинекологических заболеваний, которые часто приводят к летальному исходу при отсутствии своевременной диагностики и последующего лечения. Если же формирование атипичных клеток обнаружить на ранних этапах, болезнь можно полностью устранить, быстро добившись стадии ремиссии. Однако для этого требуется своевременно определять злокачественный процесс при помощи выявления онкомаркера p16ink4ac. 

Лаборанты рекомендуют более информативный метод жидкостной цитологии, который предоставляет ряд преимуществ для лечащего врача и пациента:

  • диагностика рака шейки матки на ранних этапах, еще до развития клинической симптоматики благодаря выявлению внедрения специфического белка внутрь эпителиальных клеток на поверхности шейки матки;
  • отслеживание динамики распространения онкомаркера по клеткам, степени распространения видоизмененных структур по нормальным тканям;
  • диагностика течения болезни при назначении методов терапии;
  • отслеживание качества лечения в процессе его применения и после завершения;
  • отслеживание пациентов из группы риска, у которых наблюдается вирус папилломы человека (ВПЧ);
  • оценка состояния эпителия шейки матки при ранее пережитом онкологическом заболевании, которое наблюдалось на внутренних половых органах;
  • отслеживание не только закаченных процессов, но и риска развития инфекции, доброкачественного разрастания эпителиальных клеток;
  • выявление воспалительных процессов инфекционной и неинфекционной природы.

Исследование биоматериала осуществляется посредством микроскопии. В образце врач может рассмотреть не только наличие или отсутствие атипичных клеток, но и другие отклонения. Например, они могут свидетельствовать о бактериальной и грибковой инфекции, воспалении. Поэтому анализ предоставляет комплексные сведения.

Тест назначает врач гинеколог или онколог. Его можно выполнять как в профилактических целях для своевременного выявления начала патологии, так и в лечебных при уже выявленной болезни и назначении методов терапии. Так как при заборе биоматериала ткани не повреждаются, самочувствие пациентки не ухудшается, анализ можно проводить многократно.